Hybridom-Fusions- und Selektionsmedium (HAT)

产品信息 Produktbeschreibung

产品名称

Produktname

杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

Hybridom-Fusions- und Selektionsmedium (HAT)

货号 Kat.Nr

BRS-MED01

规格

Spezifikation

500 ml/µl

500 ml / Flasche

产品组分

Komponenten

DMEM-Testversion: 80 % (nicht verfügbar)

DMEM-Basismedium: 80 % (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Importiertes fötales Rinderserum (FBS): 10 % (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Konditioniertes Medium: 10 % (v/v)

Konzentration: 100 ml/mL

Penicillin: 100 U/ml

Konzentration: 100 ml/mL

Streptomycin: 100 U/ml

Konzentration (Hypoxanthin): 100 uM

Hypoxanthin: 100 µM

Konzentration (Thymidin): 16 uM

Thymidin: 16 µM

Konzentration (Aminopterin): 0,4 uM

Aminopterin: 0,4 µM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Weitere Zusatzstoffe: Verschiedene Zytokine (ausreichende Menge) und Nahrungsergänzungsmittel

保存条件

Lagerbedingungen

-20 Grad Celsius, spätestens 18°C.

Bei -20 Grad lagern. Haltbarkeit: 18 Monate.

使用方法

Gebrauchsanweisung

培养基融化:

37 Grad;

Dauer: 3–5 Minuten使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Auftauen des Mediums:

Tauen Sie das Medium in einem 37-Grad-Wasserbad auf. Wischen Sie die Außenfläche mit 70 %igem Ethanol ab und legen Sie sie zur Verwendung in einen Biosicherheitsschrank.
Hinweis: Das Auftreten einer kleinen Menge weißen, flockigen Materials nach dem Auftauen ist normal. Lassen Sie das Medium 3–5 Minuten lang stehen, damit sich die Flocken am Boden absetzen, und sammeln Sie dann den Überstand vorsichtig zur Verwendung auf.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul/孔)铺 96 孔板,置37 Grad 5 % CO2 培养箱静置培养.

Zellfusion und Aussaat:

Führen Sie die Zellfusion mit physikalischen (Elektrofusion) oder chemischen (konventionelles PEG) Methoden durch. Resuspendieren Sie die fusionierten Zellen direkt in diesem Medium mit geeigneter Dichte und Volumen:

Elektrofusion: 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ Zellen/Well

PEG-Fusion: 5 × 10⁴ – 1 × 10⁵ Zellen/Well
Empfohlenes Volumen: 200 µL/Well in einer 96-Well-Platte.
Für die Kultur bei 37 Grad und 5 % CO₂ inkubieren.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Medium-Ersatz:

Führen Sie an den Tagen 4–8 nach der -Fusion je nach Wachstumsstatus der Zellen einen teilweisen oder vollständigen Mediumaustausch durch.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Klon-Screening:

Wenn die Zellklone in den Vertiefungen eine angemessene Größe erreichen, führen Sie ein positives Klon-Screening durch.

注意事项

Vorsichtsmaßnahmen

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Dieses Produkt ist giftig und nur für die Selektion und Kultivierung von Hybridomzellen bestimmt. Es darf nicht für die Züchtung lebender Tiere, diagnostische Zwecke oder therapeutische Anwendungen verwendet werden.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养, 不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1, SP2/0 等).

Dieses Produkt eignet sich für die Selektion und Kultivierung von Hybridomzellen mithilfe des HGPRT-Selektionssystems. Sie gilt nicht für TK oder andere Auswahlsysteme. Dieses Medium kann nicht für die direkte Kultivierung von HGPRT--defizienten Zellen (z. B. NS1, SP2/0) verwendet werden.

Der pH-Wert liegt zwischen 7,2 und 7,4.

Bei diesem Produkt handelt es sich um eine sterile Lösung mit einem pH-Wert von 7,2–7,4. Die gesamte Handhabung muss unter aseptischen Bedingungen erfolgen.