Medium zur Expansion und Subklonierung von Hybridomzellen

产品信息 Produktbeschreibung

产品名称

Produktname

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Medium zur Expansion und Subklonierung von Hybridomzellen

货号 Kat.Nr

BRS-MED02

规格

Spezifikation

500 ml/µl

500 ml/Flasche

产品组分

Komponenten

DMEM-Testbericht: 80 % (mehr)

DMEM-Basismedium: 80 % (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Fetales Rinderserum (FBS, importiert): 10 % (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Konditioniertes Medium: 10 % (v/v)

Konzentration: 100 ml/mL

Penicillin: 100 U/ml

Konzentration: 100 ml/mL

Streptomycin: 100 U/ml

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Andere Zusatzstoffe: Einzelzellproliferationsfaktoren und Ergänzungsmittel mit kleinen Molekülen

保存条件

Lagerbedingungen

-20 Grad Celsius, spätestens 18°C.

Bei -20 Grad lagern, Haltbarkeit 18 Monate

使用方法

Gebrauchsanweisung

培养基融化:

37 Grad;

Dauer: 3–5 Minuten

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Auftauen des Mediums:

Tauen Sie das Medium in einem 37-Grad-Wasserbad auf. Wischen Sie die Außenfläche mit 70 %igem Ethanol ab und stellen Sie sie zur Verwendung in einen Biosicherheitsschrank.
Hinweis: Das Auftreten einer kleinen Menge weißen, flockigen Materials nach dem Auftauen ist normal. Lassen Sie das Medium 3–5 Minuten lang stehen, damit sich die Flocken absetzen können, und sammeln Sie dann den Überstand zur Verwendung.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0.8-1.5cell/孔/200ul培养基铺板.

Umgang mit Fusionsbrunnen – gesunde Zellen:

Bei Fusionsvertiefungen mit Zellen in gutem Zustand (z. B. mittlere Farbe normal oder leicht gelb, Zellen erscheinen unter dem Mikroskop gesund, hell und von normaler Größe), vorsichtig mit einer gelben Pipettenspitze auf- und abpipettieren. Zählen Sie die Zellen und plattieren Sie sie mit 0,8–1,5 Zellen/Well in 200 µL Medium.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Umgang mit Fusionsbrunnen – suboptimale Zellen:

Für Fusionsvertiefungen mit Zellen in suboptimalem Zustand (z. B. Medium angesäuert/gelb oder Zellen erscheinen unter dem Mikroskop geschrumpft und dunkel), stehen zwei Optionen für die anschließende Subklonierung zur Verfügung:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml, 24%板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1.5cell/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

Option 1: Übertragen Sie Zellen aus dem Fusionsbrunnen in eine 24-Well-Platte, die 1 ml dieses Mediums enthält. Zählen Sie nach 2–3 Tagen Expansion die Zellen und führen Sie eine Subklonierung mit 0,8–1,5 Zellen/Well in 200 µL Medium durch. In diesem Stadium ist die Zellverdoppelung begrenzt, aber der Zustand der Zellen ist gut, was sie ideal für die Subklonierung macht.

2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培养基,至37度5% CO2-Konzentration: 3–4 Monate, 0,8–1,5 Zellen/m/200 ul/min;

Entfernen Sie den Überstand vorsichtig mit einer gelben Pipettenspitze aus der Fusionsmulde und geben Sie 200 µL frisches Medium pro Mulde hinzu. 3–4 Stunden lang bei 37 Grad und 5 % CO₂ inkubieren. Nehmen Sie dann eine Probe der Zellen, zählen Sie sie und führen Sie eine Subklonierung mit 0,8–1,5 Zellen/Well in 200 µL Medium durch.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Hinweis: Subklone, die mit dem Hybridom-Zellexpansions- und Subklonierungsmedium kultiviert werden, erreichen typischerweise an den Tagen 6–8 nach-das Subklonieren ein Stadium, das für ein nachgelagertes Screening oder eine Analyse geeignet ist.